本方法的基本原理是樣品中的甲醛在PH為5.5—7.0條件下,與乙酰丙酮及銨離子,生成黃色的3、5—乙酰基—1、4二氫吡啶二碳酸,在412nm波長下有最大吸收,用標準曲線法定量
1、 檢測設備和試劑
1.1檢測設備:UV-1200紫外可見分光度計(美析儀器)
1.2試劑
1.2.1乙酰丙酮溶液:吸取3.0ml乙酰丙酮(AR)用水稀釋至200ml。
1.2.2乙酸—乙酸銨緩沖溶液:稱取15.42g乙酸銨(AR)溶于300ml水中,加入2.3ml冰醋酸,調PH值近5.75,用水稀釋至400ml。
1.2.3 硫酸鈉溶液:稱取20g無水硫酸鈉(AR)溶于250ml燒杯中,加入100ml水溶解。
1.2.4 乙酸鋅溶液:稱取20g乙酸鋅(AR)加水溶解并稀釋至200ml。
1.2.5 氫氧化鈉溶液:稱取20g氫氧化鈉(AR)于500ml燒杯中,加水溶解并稀釋至500ml。
1.2.6甲醛標準溶液:10.0mg/ml(由國家標準物質研究中心購進)
1.2.7 甲醛標準使用液:由甲醛標準溶液稀釋成10ug/ml甲醛標準使用液。
2、檢測環境條件:常規室溫
3、標準曲線的制作
分別吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80ml甲醛標準使用液(相當甲醛含量為:0.00,2.0,4.0
,6.0,8.0ug甲醛)于10ml比色管中,加入2ml乙酸—乙酸銨緩沖溶液和1ml乙酰丙酮溶液,加水至刻度,混勻,置70℃水浴中放置30min,取出冷卻至室溫后,用25px比色杯,于412nm處以零號管調節零點,測定吸光度,以吸光度及甲醛的含量為縱、橫坐標,繪制標準曲線。
4、樣品處理
稱取面制品樣品5.00g于50ml具塞比色中,加入35ml硫酸鈉溶液,加塞,混勻,置60℃水浴中放置一小時,并不斷振搖,取出,冷卻后,加入5ml乙酸鋅溶液和3ml氫氧化鈉溶液,用水定容至50ml,混勻,放置20min,3000r/min,離心,取上清液過濾,備用,同時做空白試驗。
5、樣品測定:
吸取上述樣品處理液5.0mL于10ml比色管中,依自“加入2ml乙酸—乙酸銨緩沖溶液……”起同法操作,同時作空白,為參比液,根據測得的吸光度,從標準曲線上查出被測液中甲醛含量,從而計算出樣品中甲醛的含量。
6、結果計算:
X(g/kg)= m1*1000/(m*5/50*1000*1000)
式中:X——樣品中甲醛含量,g/kg;
m1——從標準曲線上查出的被測液中的甲醛的含量,ug;
m——樣品的質量,g。
7、工作曲線及檢出限
本方法有良好的線性關系,所得標準曲線的相關系數r=0.9998,回歸方程為:y=0.043x+0.0
09,甲醛的檢出限為0.04ug.
8、回收率與精密度
分別添加50ug,200ug,600ug甲醛于樣品中,按上述方法測定5次,計算平均回率(P)為99~101%,說明本方法準確度較高。相對標準偏差(RSD)為0.5~1.4%,精密度滿足方法的要求,見表一。
表一
回收率(%)
________________________________________
添加量(ug) 1 2 3 4 5 P( % ) RSD(%)
50 99.8 101.4 103.7 101.2 100.9 101.4 1.3
200 100.0 99.7 103.4 99.9 101.1 100.8 1.4
600 99.2 99.5 98.8 99.9 98.6 99.2 0.5
從以上結果可以看出,選取高、中、低三個濃度水平分別測定(n=5)被測組分的回收率,結
果良好,說明本方法準確度較高.RSD為0.5—1.4%,精密度滿足方法的要求.由以上結果可見:本方法完全適用于面制品等食品中甲醛含量的測定。